在科研工作中，大家或许都有过类似经历：面对一批实验小鼠，必须依次对其实施解剖，精细分离各种组织器官，继而提取DNA并经过纯化程序，再进行PCR扩增，直至完成电泳检测分析。如此复杂的流程常常耗时超过一天，而这一切努力的目标仅仅是确认小鼠DNA中是否包含特定目标基因。其中，DNA提取和纯化步骤堪称冗长繁杂。现在有一个问题值得探究：是否有捷径可以绕过这些步骤，直接检验目标基因呢？这里，小翌为您推荐一项创新的PCR技术——直扩PCR，它能有效地帮助您应对这一挑战，简化实验过程。
直接PCR（Direct PCR）是一种特殊的聚合酶链反应（PCR）技术，无需经过核酸提取纯化步骤，即可运用植物、动物组织、血液等未经处理的原始样本进行PCR扩增。相较于依赖严格纯化核酸的传统PCR方法，直接PCR摒弃了耗时的提取阶段，极大程度地简化实验流程，缩短实验时间，加快实验进度，并减小了在提取过程中可能引入的污染风险。其核心技术特征在于采用了对样本内抑制物质具有 抵抗性的聚合酶，确保即使在未经纯化的样本环境中，模板DNA也能成功释放并在PCR反应体系中有效扩增，从而为DNA扩增提供了 的简易途径。
图1. 直扩PCR与传统PCR技术比对图
翌圣生物研发的直扩PCR系列具有优秀的耐受抑制组分，有针对如动物、植物组织等不同样本的PCR产品，无需核酸提取纯化，助力快速检测。从样本开始，以未经基因组纯化的微量原始样本（图1-A）或其裂解产物（图1-B）作为模板，进行PCR-based Genotyping（见图1）。与常规PCR-based Genotyping相比，直接PCR试剂盒样本用量少，操作简单，实验成本低，可高通量化样本检测。
图2. 直扩PCR扩增流程图
A.直接法：取少量样本直接加入到PCR Master Mix中，进行PCR鉴定；
B.裂解法：样本取样后，加入裂解液中，裂解释放基因组，取少量裂解上清液加入到PCR Master Mix中，进行PCR鉴定。
明星产品推荐
适用样本：水稻、大豆、玉米、拟南芥等植物的叶片、种子
产品优势：裂解时间仅需0-10 min
不同类型植物叶片扩增效率高
图3. 使用Plant Tissue PCR Kit (With Dye)扩增不同类型植物叶片结果。M：100 bp DNA ladder。C：相应植物纯化基因组DNA为模板。1-2：叶片组织裂解产物为模板。循环数：30个循环。
适用样本：含EDTA、肝素、柠檬酸盐等常规抗凝剂的新鲜血液、冷藏（冻）血液及Whatman903®和FTA®商用干
产品优势：扩增速度快，仅需3-10 sec/kb
扩增长度高达8 kb
图4. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从人全血中扩增不同长度DNA片段。血样为-20℃储存的EDTA抗凝血，血液模板浓度为10%，延伸时间设置10 sec/kb。M为10510ES60（Yeasen）。
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耐受性强
图5 A. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从人EDTA抗凝全血中扩增2 kb长度、GC含量71%的DNA片段。血液模板浓度设置梯度0.5-50%，延伸时间为10 sec/kb。B. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从小鼠EDTA抗凝全血中扩增2.2 kb长度、GC含量67%的DNA片段。血液模板浓度设置0.5-50%，延伸时间为10 sec/kb。M为10510ES60（Yeasen）。
适用样本：小鼠组织（如鼠尾、鼠耳、鼠趾等）
产品优势：对样本投入量要求低，仅需5 mg小鼠组织或1-5 mm鼠尾
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广泛的模板兼容性
图6. 使用Mouse Tissue Direct PCR Kit Plus直接裂解（70℃裂解10 min）扩增人293细胞、唾液、头皮组织，均有明显的目的条带，Marker: 10510ES60 (Yeasen).
扩增速度及产量对比
1. 质粒 10189 1 kb11. 质粒 10189 2 kb
2. T品牌 鼠耳 1 kb12. T品牌鼠尾 2 kb
3. T品牌鼠尾 1 kb13. T品牌鼠耳 2 kb
4. T品牌鼠趾 1 kb14. T品牌鼠趾 2 kb
5-6. 10189 鼠耳 1 kb15-16. 10189 鼠耳 2 kb
7-8. 10189 鼠尾 1 kb17-18. 10189 鼠尾 2 kb
9-10. 10189 鼠趾 1 kb19-20. 10189 鼠趾 2 kb
图7. 使用Mouse Tissue Direct PCR Kit Plus和T品牌产品裂解不同组织扩增不同大小的目的片段，10189ES延伸速率为5 sec/kb，T品牌延伸速率60 sec/kb。（70℃裂解10 min）
结论：Mouse Tissue Direct PCR Kit Plus对不同组织裂解产物进行不同大小的目的片段扩增，在快速扩增的同时，均可达到产品定位的扩增效果，尤其是2 kb的扩增效果优于竞品。
产品推荐
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产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
规格 |
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低投入量小鼠组织直扩PCR |
Mouse Tissue Direct PCR Kit Plus |
10189ES50/70 |
50 T/200 T |
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小鼠组织直扩PCR |
Mouse Tissue Direct PCR Kit(With Dye) 小鼠组织直接PCR试剂盒 |
10185ES50/70 |
50 T/200 T |
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植物组织直扩PCR |
Plant Tissue PCR Kit (With Dye)植物组织直接PCR试剂盒 |
10187ES50/70 |
50 T/200 T |
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血液直扩PCR，耐受不同抗凝剂 |
Blood Advanced Direct PCR Kit |
10188ES50/70 |
50 T/200 T |
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增加PCR反应的灵敏度和特异性 |
PCR Enhancer PCR增强剂 |
10117ES03 |
1 mL |
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